Chemiluminescence Immunoassay, CLIA er en meget følsom immunoassayteknik.
1. Princip
Kemiluminescens immunoassay kombinerer specificiteten af immunrespons og den høje sensitivitet af kemiluminescens. Dets grundlæggende princip er at kombinere det specifikke immunrespons mellem antigen og antistof med kemiluminescensreaktion. Specifikt kombineres antigenet i prøven, der skal testes, med et specifikt antistof for at danne et immunkompleks. Derefter, gennem en række kemiske reaktioner, producerer immunkomplekset et kemiluminescerende signal. Luminescensintensiteten er proportional med koncentrationen af antigenet, der skal testes, og indholdet af antigenet, der skal testes, kan analyseres kvantitativt ved at detektere luminescensintensiteten.
2. Hovedkomponenter
Antistoffer: inklusive indfangningsantistoffer og detektionsantistoffer. Indfangningsantistoffet er sædvanligvis fikseret på en fastfasebærer for at fange antigenet, der skal testes. Detektionsantistoffet kombineres med en kemiluminescerende markør for at påvise antigenet i immunkomplekset.
Fastfase-bærer: såsom mikroplader, magnetiske perler osv., der bruges til at fiksere indfangningsantistoffet for at lette immunreaktion og adskillelse og vask.
Kemiluminescerende markør: sædvanligvis et stof, der kan producere et selvlysende signal i en kemisk reaktion, såsom luminol, acridiniumester osv. Markøren kombineres med detektionsantistoffet for at producere et kemiluminescerende signal efter immunreaktionen.
Detektionssystem: inklusive udstyr såsom luminescensdetektorer, som bruges til at detektere intensiteten af kemiluminescerende signaler og konvertere dem til læsbare værdier.
3. Funktioner
Høj følsomhed: Det kan detektere ekstremt lave koncentrationer af teststoffet, som normalt er flere størrelsesordener mere følsomt end traditionelle immunoassay-metoder.
Bredt lineært område: Indholdet af teststoffet kan måles nøjagtigt i et bredt koncentrationsområde uden flere fortyndinger.
Stærk specificitet: Baseret på den specifikke binding af antigen og antistof er den yderst selektiv for specifikke teststoffer.
Hurtig: Detektionsprocessen er relativt hurtig, og resultaterne kan generelt opnås på kortere tid.
Høj grad af automatisering: Den er velegnet til påvisning af prøver i stor skala og kan bruges sammen med automatiserede instrumenter for at forbedre detektionseffektiviteten.
4. Anvendelsesområder
Klinisk diagnose: Det bruges til at detektere forskellige biomarkører, såsom tumormarkører, hormoner, infektionssygdomsmarkører osv., for at give et vigtigt grundlag for sygdomsdiagnostik, behandlingsovervågning og prognoseevaluering.
Lægemiddeludvikling: Det bruges til lægemiddelkoncentrationsovervågning, effektivitetsevaluering og lægemiddelmetabolismeforskning.
Fødevaresikkerhedstest: Påvisning af skadelige stoffer, pesticidrester, veterinære lægemiddelrester osv. i fødevarer.
Miljøovervågning: Påvisning af forurenende stoffer og giftige stoffer i miljøet.